準(zhǔn)確的分析方法對(duì)于生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)是極為重要的，在各種生物化學(xué)分析技術(shù)中，首先要熟練掌握的就是準(zhǔn)確的移液技術(shù)。為此要用到各種形式的移液管，其中有一些是學(xué)生們?cè)诨瘜W(xué)實(shí)驗(yàn)中未用過(guò)而在生化實(shí)驗(yàn)中是常用的。

 

 

1 滴管

 

 

使用方便，可用于半定量移液，其移液量為1mL～5mL，常用2mL，可換不同大小的滴頭。滴管有長(zhǎng)、短兩種，新出的一種帶刻度和緩沖泡的滴管，可以比普通滴管更準(zhǔn)確地移液，并防止液體吸入滴頭。

 

 

 

2 移液管(吸管)

 

 

吸管使用前應(yīng)洗至內(nèi)壁不掛水珠，1mL 以上的吸管用吸管刷刷洗，0.1mL、0.2mL 和0.5mL的吸管可用洗滌劑浸泡，必要時(shí)可以用超聲清洗器清洗。由于鉻酸洗液致癌，應(yīng)盡量避免使用。若有大量成批的吸管洗后沖洗，可使用沖洗桶，將吸管向上置于桶內(nèi)，用自來(lái)水多次沖洗后再用蒸餾水或無(wú)離子水沖洗。

 

 

吸管分為兩種，一種是無(wú)分度的，稱(chēng)為大肚吸管，度較高，其相對(duì)誤差A(yù) 級(jí)為0.7％~0.8％，B 級(jí)為1.5％~0.16％，液體自標(biāo)線流至口端(留有殘液)，A 級(jí)等待15s，B 級(jí)等待3s。另一種吸管為分度吸管，管身為一粗細(xì)均勻的玻璃管，上面均勻刻有表示容積的分度線，其準(zhǔn)確度低于胖肚吸管，相對(duì)誤差A(yù) 級(jí)為0.8％～0.2％，B 級(jí)為1.6％～0.4％，A 級(jí)、B 級(jí)在吸管身上有A、B 字樣，有”快”字則為快流式，有”吹”字則為吹出式，無(wú)”吹”字的吸管不可將管尖的殘留液吹出。吸、放溶液前要用吸水紙擦拭管尖。

 

 

3 微量進(jìn)樣器

 

 

微量進(jìn)樣器常用作氣相和液相色譜儀的進(jìn)樣器，在生化實(shí)驗(yàn)中主要是用作電泳實(shí)驗(yàn)的加樣器。

 

 

常可分為無(wú)存液和有存液兩種。

 

 

(1)10μL 以下的極微量液體進(jìn)樣。

 

 

無(wú)存液微量進(jìn)樣器：進(jìn)樣器的不銹鋼芯子直接通到針處，不會(huì)出現(xiàn)存液。

 

 

(2)10μL～100μL 有存液微量進(jìn)樣器：不銹鋼的針尖管部分是空管，進(jìn)樣器的柱塞不能到達(dá)，因而管內(nèi)會(huì)存有空氣或液體。

 

 

 

使用注意事項(xiàng)是：

 

①不可吸取濃堿溶液，以免腐蝕玻璃和不銹鋼零件；

 

②因?yàn)橛写嬉?，所以吸液時(shí)要來(lái)回多拉幾次，將針尖管內(nèi)的氣泡全部排盡；

 

③針尖管內(nèi)孔極小，使用后尤其是吸取過(guò)蛋白質(zhì)溶液后，必須立即清洗針尖管，防止堵塞。若遇針尖管堵塞，不可用火燒，只能用φ0.1mm 的不銹鋼絲耐心串通；

 

④進(jìn)樣器未潤(rùn)濕時(shí)不可來(lái)回干拉芯子，以免磨損而漏氣；

 

⑤若進(jìn)樣器內(nèi)發(fā)黑，有不銹鋼氧化物，可用芯子蘸少量肥皂水，來(lái)回拉幾次即可除之。

 

 

4 自動(dòng)取液器

 

 

這種取液器在生化實(shí)驗(yàn)中大量地使用，它們主要用于多次重復(fù)的快速定量移液，可以只用一只手操作，十分方便。移液的準(zhǔn)確度(即容量誤差)為±(0.5％～1.5％)，移液的精密度(即重復(fù)性誤差)更小些，為≤0.5％。

 

 

取液器可分為二種：一種是固定容量的，常用的有100μ L 等多種規(guī)格。每種取液器都有其的聚丙烯塑料吸頭，吸頭通常是一次性使用，當(dāng)然也可以超聲清洗后重復(fù)使用，而且此種吸頭還可以進(jìn)行120℃高壓滅菌；另一種是可調(diào)容量的取液器，常用的有200μL、 500μL 和1000μL 等幾種。

 

 

可調(diào)式自動(dòng)取液器的操作方法是用拇指和食指旋轉(zhuǎn)取液器上部的旋鈕，使數(shù)字窗口出現(xiàn)所需容量體積的數(shù)字，在取液器下端插上一個(gè)塑料吸頭，并旋緊以保證氣密，然后四指并攏握住取液器上部，用拇指按住柱塞桿頂端的按鈕，向下按到*停點(diǎn)，將取液器的吸頭插入待取的溶液中，緩慢松開(kāi)按鈕，吸上液體，并停留1～2秒鐘(粘性大的溶液可加長(zhǎng)停留時(shí)間)，將吸頭沿器壁滑出容器，用吸水紙擦去吸頭表面可能附著的液體，排液時(shí)吸頭接觸傾斜的器壁，先將按鈕按到*停點(diǎn)，停留一秒鐘(粘性大的液體要加長(zhǎng)停留時(shí)間)，再按壓到第二停點(diǎn)，吹出吸頭尖部的剩余溶液，如果不便于用手取下吸頭，可按下除吸頭推桿，將吸頭推入廢物缸。

 

 

自動(dòng)取液器的使用注意事項(xiàng)是：

 

 

①吸取液體時(shí)一定要緩慢平穩(wěn)地松開(kāi)拇指，絕不允許突然松開(kāi)，以防將溶液吸入過(guò)快而沖入取液器內(nèi)腐蝕柱塞而造成漏氣。

 

 

②為獲得較高的精度，吸頭需預(yù)先吸取一次樣品溶液，然后再正式移液，因?yàn)槲⊙宓鞍踪|(zhì)溶液或有機(jī)溶劑時(shí)，吸頭內(nèi)壁會(huì)殘留一層”液膜”，造成排液量偏小而產(chǎn)生誤差。

 

 

③濃度和粘度大的液體，會(huì)產(chǎn)生誤差，為消除其誤差的補(bǔ)償量，可由試驗(yàn)確定，補(bǔ)償量可用調(diào)節(jié)旋鈕改變讀數(shù)窗的讀數(shù)來(lái)進(jìn)行設(shè)定。

 

 

④可用分析天平稱(chēng)量所取純水的重量并進(jìn)行計(jì)算的方法，來(lái)校正取液器，1mL 蒸餾水20℃時(shí)重0.9982g。